Nuevas tecnologías para la detección del Virus del Papiloma Humano
El cáncer cervicouterino es el segundo cáncer más común en la mujer a nivel mundial, con cerca de 500 000 nuevos casos cada año. La mortalidad es alta tanto en países desarrollados como en vías de desarrollo, con 200,000 muertes al año en países en vías de desarrollo comparadas con las 70,000 muertes al año en países desarrollados.
La mitad de los casos de cáncer cervical identificados cada año ocurren en mujeres quienes no tuvieron una toma adecuada de la muestra de Papanicolaou o por poca cobertura en la población de este estudio. Por lo tanto, en la búsqueda de alternativas tecnológicas para la detección de cáncer cervical, debe tomarse en cuenta la fuerte relación que existe entre el Virus del Papiloma Humano (VPH) de Alto Riesgo y el cáncer cervical; lo que sienta las bases para nuevas áreas de investigación que incluyen la aplicación de pruebas para VPH y biomarcadores que posibiliten la identificación de mujeres con alto riesgo de desarrollar cáncer cervical o lesiones precancerosas.
Las pruebas para el VPH de alto riesgo son altamente sensibles, pero tienen poca capacidad de detectar las lesiones precancerosas, en comparación con la citología vaginal (Papanicolaou) cuyo costo es mucho menor pero alto valor predictivo para las lesiones precancerosas. Veamos, de que se tratan estas pruebas:
Inspección ocular de la vagina y cérvix con aplicación de ácido acético
En muchas ocasiones, la presencia de una zona de tejido lesionado puede pasar inadvertida al realizarse la inspección habitual; sin embargo cuando al tejido se le aplica ácido acético, esta zona de lesión resalta inmediatamente ya que su coloración se torna hacia los tonos blancos, lo que la hace fácilmente identificable. El problema de este sistema es que pueden existir lesiones diminutas, no perceptibles para el ojo humano, lo que puede conducir a omisiones en el diagnóstico.
Colposcopía
Es casi el mismo procedimiento que el anterior, con la diferencia de que se utiliza un aparato a base de lentes de aumento, esto magnifica la imagen y con ello se pueden identificar las lesiones mas diminutas. En este procedimiento también se aplica al tejido estudiado una sustancia llamada ácido acético que produce un cambio blanquecino en el tejido afectado, de igual forma se aplica una sustancia café llamada Lugol, este químico tiñe el tejido sano de color obscuro y permite contrastar visualmente las lesiones blancas. La ventaja de este equipo es que tiene además una luz verde que permite resaltar la distribución de los vasos sanguíneos en el tejido estudiado, lo que es fundamental para establecer el grado de avance o invasión de la lesión. Su defecto es que depende totalmente de la visión y expertis del médico y lamentablemente suele haber muchos diagnósticos equivocados.
Papanicolaou
Prueba ya clásica dentro de los procedimientos diagnósticos que se realizan en ginecología, también recibe el nombre de Citología vaginal, o Frotis cervico-vaginal. Este método consiste en el raspado o frotamiento (frotis) del tejido cervical, ya sea con un palo de madera de forma especial llamado espátula, o con un cepillo que puede tener mas o menos la forma de una brocha o la forma de un cepillo para lavar mamilas de dimensiones pequeñas. Al realizar el frotis lo que en realidad se está haciendo es extraer las células del cérvix y vagina; esta muestra se deposita en una laminilla de cristal y se aplica una sustancia para su conservación, posteriormente se envía al laboratorio para su análisis bajo el microscopio. La ejecución adecuada y eficiente de esta prueba requiere de entrenamiento y técnica depurada, y es precisamente la falta de estos requisitos que han rodeado a esta técnica de mala fama, calificándosele, incluso, de obsoleta. La gran valía de esta técnica, cuando es realizada adecuadamente, es que tiene bajo costo, es accesible prácticamente en cualquier parte y logra identificar lesiones precancerosas (llamadas lesiones precursoras), lo que permite implementar acciones medicas para frenar el proceso y evitar así, la aparición de cáncer cervicouterino. Por otro lado, el frotis vaginal también ofrece un panorama del estado inflamatorio, infeccioso y hasta hormonal del tejido cervico-vaginal, lo que amplia satisfactoriamente el diagnóstico.
Citología de base líquida
Uno de los inconvenientes con la citología convencional, es que muchas células se quedan adheridas en la espátula o cepillo con el cual se tomó la muestra; puede suceder entonces que estas células adheridas al instrumento tengan datos importantes para el diagnóstico de alguna patología, y por lo tanto al no haberse depositado en la laminilla para su estudio, el diagnóstico estará equivocado o incompleto. La Citología de Base Líquida permite sumergir el cepillo especialmente diseñado para este propósito en un recipiente que contiene un líquido especial; este líquido permite la adecuada conservación de las células para su traslado del consultorio al laboratorio de patología, por otro lado el líquido facilita que el 99% de las células obtenidas se desprendan del cepillo y se puedan analizar todas en el microscopio. El líquido ya con las células incorporadas en él, permite una mejor manipulación de la muestra, lo que eficientiza su estudio y por ende el diagnóstico.
Reacción en cadena de polimerasa (PCR)
Recordemos un poco, todos los seres vivos, ya sea virus o Humano requerimos de material genético (ADN o ARN). La célula contiene en su interior un Núcleo y este, por así decirlo, es como el cerebro de la célula, dirige el accionar de la célula y su reproducción. El Núcleo celular está conformado de unas sustancias químicas llamadas ADN (AcidoDesoxirriboNucleico), y este es lo que marca la diferencia entre las diferentes especies. Actualmente se tiene identificado como es el ADN de las bacterias, de los virus, de las diferentes especies de animales y por supuesto, del Humano.
PCR son las siglas en inglés de Polymerase Chain Reaction o Reacción en Cadena de la Polimerasa. La idea básica de esta tecnología es hacer una copia exacta del ADN del organismo que queremos estudiar, esto nos permite identificar con exactitud el ADN y a quien o que corresponde, de tal suerte que podemos evidenciar si existe el Virus del Papiloma Humano en la muestra que se está analizando y podemos saber a que categoría pertenece el virus detectado. Esta técnica es de suma importancia en aquellos casos en donde los estudios previos son contradictorios y/o no hay una evidencia clara de la existencia de la infección. Por lo general, la PCR es una técnica común y normalmente indispensable en laboratorios de investigación médica y biológica para una gran variedad de aplicaciones. Entre ellas se incluyen la clonación de ADN para la secuenciación, la filogenia basada en ADN, el análisis funcional de genes, el diagnóstico de trastornos hereditarios, la identificación de huellas genéticas (usada en técnicas forenses y test de paternidad) y la detección y diagnóstico de enfermedades infecciosas.
Captura de híbridos para VPH de alto riesgo (2a Generación)
Esta es la técnica más avanzada y de reconocimiento mundial, dado que tiene un rango menor de resultados equivocados, es fácil de implementar y es muy sensible para detectar DNA del virus de VPH de alto riesgo. La técnica se realiza sobre la muestra del tejido cervicovaginal. Se antoja difícil de explicar dado que esta prueba es muy sofisticada; así que permítanme usar un ejemplo: Supongamos que sabemos que existe en el mar una especie de animal marino muy peligroso, que está acabando con el ecosistema y destruyendo diversas especies. Lo conocemos muy bien, es diminuto, sabemos su color, su forma y sus hábitos, el problema es que es muy escurridizo, y muy difícil de localizar en el basto mar. Bueno, pues como lo conocemos perfectamente, se diseña en el laboratorio una copia perfecta de la mitad de este animal, esta copia o esta mitad será capaz de unirse con la mitad real del animal; así que primero se libera en el océano en donde se sospecha que se encuentra el animal, una sustancia química que dividirá al animal en dos partes, posteriormente lanzamos las mitades hechas en el laboratorio, estas entonces se unirán con la mitad real del animal; las mitades que fabricamos tienen la propiedad de unirse a colorantes fluorecentes y esto evidenciará visualmente su ubicación, pero además, estas mitades están diseñadas para unirse como imánes, a objetos mucho más grandes que a su vez tienen miles de focos y que al adherirse a la mitad artificial, encenderán tan intensamente que será muy fácil dar con su ubicación. Del mismo modo esta prueba manipula el DNA del virus del VPH.
Marcadores moleculares P16
Se ha descubierto el efecto químico de la acción del VPH en el DNA de la célua y uno de estos cambios es la acumulación de una proteína p16INK4A. Así que al detectar esta sustancia sabremos que está el virus incorporado a la célula y en consecuencia, infectada. El estudio detecta esta proteína y se le adhieren partículas que cambian de color. De esta forma, al ver el tejido en el microscopio, se hace evidente la presencia del virus por el cambio de color en las células.
Así que en la actualidad contamos con diferentes tecnologías para detectar el virus, y este dato se vuelve relevante para aquellos casos en donde existe la duda de la presencia o no del Virus del Papiloma Humano. Por otro lado estos estudios nos permiten dar seguimiento a aquellos pacientes que han sido tratados de la infección por VPH. Afortunadamente, en México están disponibles todas estas tecnologías y de hecho, se ha incorporado a la Norma Oficial Mexicana la recomendación de realizar en el paciente la prueba de Captación de Híbridos como parte de la prevención.